Specifični koraci za ekstrakciju klorofila kroz ćelijsku fragmentaciju pomoću ultrazvučne drobilice ćelija

Ultrazvučna drobilica ćelija koristi efekat disperzije ultrazvuka u tečnosti da stvori kavitaciju, razbijajući tako čvrste čestice ili ćelijska tkiva u tečnosti.
Razvoj biološke industrije podigao je zahtjeve za eksperimente sa ultrazvučnim ćelijskim pulverizatorima, kao što su mjerenje i kontrola temperature uzorka, poboljšanje nivoa inteligencije niskotemperaturnih rashladnih uzoraka i cijele mašine itd.
Specifični koraci za ekstrakciju klorofila ultrazvučnim drobljenjem ćelija pomoću ultrazvučne drobilice ćelija:
1. Centrifugirajte ili filtrirajte uzorak vode i ugradite filtersku membranu od acetatnih vlakana na usisni filter. Sipajte kvantitativnu zapreminu uzorka vode za filtraciju, a negativni pritisak tokom filtracije ne bi trebao biti previsok (oko 50kPa). Nakon što je uzorak vode izvučen, nastavite sa vađenjem još 1-2 minuta da smanjite vlagu na membrani filtera. Ako je potrebno kratkotrajno skladištenje 1-2 dana, može se čuvati u običnom frižideru za zamrzavanje. Ako je potrebno dugotrajno skladištenje (30 dana), treba ga čuvati u frižideru na niskoj temperaturi (-20 stepen ).
2. Izvadite filtersku membranu koja sadrži fitoplankton i osušite je na niskoj temperaturi u frižideru 6-8 sati. Makazama ga izrežite na male komadiće i stavite u epruvetu za centrifugiranje od 5 ml ili 10 ml. Dodajte 3-4 ml 90% acetona da uronite fragmente ispod nivoa tečnosti. Stavite fragmente u ultrazvučnu posudu i koristite ultrazvučne talase da razbijete ćelije uzorka. (Upoređivanje eksperimenata u različitim vremenima i frekvencijama kako bi se olakšala identifikacija * vremena i učestalosti fragmentacije za objedinjene metode).
3. Centrifugirajte uzorak koji je podvrgnut fragmentaciji ćelija pomoću ultrazvuka koristeći centrifugu (3000-4000r/min) 10 minuta. Sipajte supernatant u volumetrijsku tikvicu od 5 ml ili 10 ml. Razblažite do 5ml ili 10ml sa 90% acetonom i dobro promućkajte.
4. Stavite supernatant na spektrofotometar i koristite kolorimetrijsku posudu od 1 cm optičkog puta da očitate vrijednosti apsorbancije na talasnim dužinama od 750 nm, 663 nm, 645 nm, odnosno 630 nm. Koristite 90% aceton kao slijepo mjerenje apsorpcije da biste ispravili apsorbanciju uzorka.